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    Elisa試劑盒測(cè)定技術(shù)的發(fā)展

    發(fā)布時(shí)間: 2011-05-04  點(diǎn)擊次數(shù): 1418次

    Elisa試劑盒測(cè)定技術(shù)的發(fā)展


    一、Elisa試劑盒測(cè)定技術(shù)的發(fā)展
    臨床測(cè)定技術(shù)的發(fā)展主要在于方法學(xué)的發(fā)展,而方法學(xué)的發(fā)展依托于試劑生產(chǎn)技術(shù)不斷進(jìn)步更新和型標(biāo)記物的應(yīng)用。目前,分子生物學(xué)正在并zui終肯定會(huì)讓我們對(duì)整個(gè)生命科學(xué)有一個(gè)全面而*的認(rèn)識(shí),其對(duì)免疫測(cè)定技術(shù)發(fā)展的影響也是直接而又有效的,它使我們對(duì)以前一些難以檢測(cè)的生物活性物質(zhì)的測(cè)定變得輕而易舉,并且大大提高了檢測(cè)的靈敏度和特異性。
    1、基因工程試劑對(duì)免疫測(cè)定技術(shù) 發(fā)展的影響
    免疫測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何的診斷試劑離不開(kāi)的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各總化學(xué)合成方法制備。近年來(lái),隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn)。
    HBsAg試劑特點(diǎn)(檢測(cè)模式:臨 床抗體夾心法):
    包被抗體為山羊多抗,多抗具有高親和性和對(duì)抗原各種表位的反應(yīng)性。
    酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點(diǎn)的鼠復(fù)合單位。
    可測(cè)得HBsAg變異樣品。
    提高檢測(cè)的特異性(99.98%)
    提高檢測(cè)的靈敏度,應(yīng)用Parl Ehrich 學(xué)說(shuō)(PEI)HBsAg標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)ad標(biāo)準(zhǔn)品的靈敏度為0.05ng/ml,對(duì)ay標(biāo)準(zhǔn)品靈敏度為0.025ng/ml

    2、基因工程
    較早用于免疫測(cè)定的基因工程抗原是HBcAg和HBsAg,這兩種基因工程抗原的出現(xiàn),較好地解決了抗HBc和HBe的測(cè)定問(wèn)題。因?yàn)橐獜牟《颈旧砣ゴ罅揩@取這兩種純抗原較為困難,并且這一點(diǎn)對(duì)于難培養(yǎng)的病原微生物來(lái)說(shuō),如HIV、HCV和梅毒螺旋體等都有些共性。

     

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